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湖北原位雜交-原位雜交服務(wù)-貝科新肽

武漢貝科新肽科技有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
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信息詳情

原位雜交：

　　原位雜交是指用特定探針定位、檢測(cè)DNA、RNA的一種有效的實(shí)驗(yàn)方法，通過(guò)把特點(diǎn)序列客隆到特殊載體上，通過(guò)轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)一條天然的RNA探針，將探針和切片樣品進(jìn)行雜交，通過(guò)一系列顯色方法，來(lái)確定RNA或者DNA表達(dá)區(qū)域；本中心原位雜交探針采用的是第高辛和生物素標(biāo)記，靈敏度和同位素相當(dāng)。我們采用roche標(biāo)記及顯色試劑盒，GISH/ISH/FISH按照探針進(jìn)行收費(fèi)，每個(gè)試劑盒每條探針可以雜交60-80張玻片，收費(fèi)為1萬(wàn)5千元，GISH雜交因需要加抗淬滅劑每條探針收費(fèi)為1萬(wàn)9千元。量大優(yōu)惠！

DNA 探針為原位雜交提供較高的靈敏度。與RNA探針相比，DNA探針與靶mRNA 分子的雜交強(qiáng)度較弱，因此在雜交后的洗滌中不應(yīng)使用甲醛。

探針特異性至關(guān)重要。如果已知細(xì)胞中mRNA或DNA的確切核苷酸序列，則可據(jù)此設(shè)計(jì)高度的互補(bǔ)探針。如果超過(guò) 5% 的堿基對(duì)不互補(bǔ)，那么探針只能與靶序列發(fā)生輕度雜交。這意味著，探針更容易在洗滌和檢測(cè)步驟中被洗去，可能無(wú)法正確檢測(cè)。

同一樣本可以多次做原位雜交實(shí)驗(yàn)嗎?

一般情況下，如果操作沒有得到理想的結(jié)果，是可以將探針洗滌然后進(jìn)行再次的雜交的。如果使用的是直標(biāo)型探針，還可以使用不同探針對(duì)同一樣本進(jìn)行反復(fù)雜交。針對(duì)不同的樣本，處理方法略有不同。

原位雜交實(shí)操中哪些因素比較重要?

重要的因素：溫度、光照、濕度和試劑的PH值。溫度和濕度直接影響著探針和目標(biāo)DNA的雜交效率；光照影響著熒光染料的強(qiáng)度，所以探針要避光保存，其已經(jīng)雜交的片子可用防熒光淬火劑封片且避光保存；各種試劑pH也要達(dá)到要求，這也直接關(guān)系到原位雜交的穩(wěn)定性。